seurat提取表达矩阵_CNS图表复现01—读入csv文件的表达矩阵构建Seurat对象

古城微笑少年丶 2023-01-04 13:14 160阅读 0赞

分享是一种态度

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上个月我们组建了：《单细胞CNS图表复现交流群》，见：你要的rmarkdown文献图表复现全套代码来了(单细胞)，也分享了单细胞转录组数据分析的流程：

*  祖传的单个10x样本的seurat标准代码
 *  祖传的单个10x样本的seurat标准代码(人和鼠需要区别对待)
 *  seurat标准流程实例之2个10x样本的项目(GSE135927数据集)

交流群里大家讨论的热火朝天，而且也都开始了图表复现之旅，在这里我还是带大家一步步学习CNS图表吧。如果你也想加入交流群，自己去：你要的rmarkdown文献图表复现全套代码来了(单细胞)找到我们的拉群小助手哈。

今天讲解第一步：读入csv文件的表达矩阵成为Seurat对象。

交流群里共享了该文章的谷歌云文件的百度云版本，方便在中国大陆的朋友们下载。

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9G的文件，谷歌云文件的百度云版本

# **读取两个csv文件** #

如果是10x数据集，一般来说是每个样本都有3个文件，参考代码是：

但是我们这个CNS文章是直接把表达矩阵给出来了csv文件，所以直接读取，代码如下：

rm(list=ls()) options(stringsAsFactors = F) library(Seurat) # Load data  dir='./' Sys.time() raw.data "Data_input/csv_files/S01_datafinal.csv", sep=""), header=T, row.names = 1) Sys.time() dim(raw.data) raw.data[1:4,1:4] head(colnames(raw.data))  # Load metadata  metadata "Data_input/csv_files/S01_metacells.csv", sep=""), row.names=1, header=T) head(metadata)  # Find ERCC's, compute the percent ERCC, and drop them from the raw data. erccs "^ERCC-", x = rownames(x = raw.data), value = TRUE) percent.ercc fivenum(percent.ercc) ercc.index "^ERCC-", x = rownames(x = raw.data), value = FALSE) raw.data dim(raw.data)

# **构建Seurat对象** #

有了表达矩阵，直接使用 CreateSeuratObject 函数即可，然后慢慢添加这个表达矩阵的一些其它外部属性，全部代码如下：

# Create the Seurat object with all the data (unfiltered) main_tiss # add rownames to metadta  row.names(metadata) # add metadata to Seurat object  main_tiss main_tiss "percent.ercc") # Head to check head(main_tiss@meta.data) # Calculate percent ribosomal genes and add to metadata ribo.genes "^RP[SL][[:digit:]]", x = rownames(x = main_tiss@assays$RNA@data), value = TRUE) percent.ribo fivenum(percent.ribo) main_tiss "percent.ribo") main_tiss # Filter cells so that remaining cells have nGenes >= 500 and nReads >= 50000 main_tiss_filtered  50000 & nFeature_RNA > 500) main_tiss_filtered

我们得到了main\_tiss\_filtered这个变量，是一个Seurat对象，就可以follow我们的教程后后续分析流程啦。参考代码仍然是是：

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